Agarul este un polimer folosit pentru cultivarea bacteriilor. Agarul este livrat mai întâi sub formă de pulbere și, atunci când este dizolvat în apă fiartă și răcit, se solidifică la o suprafață fermă pentru creșterea bacteriană. Există multe tipuri diferite de agar care pot fi folosite pentru a crește bacteriile de interes, în funcție de specie și nevoile dvs. de cercetare. Nutrientul agar este popular deoarece poate dezvolta o varietate de tipuri de bacterii și ciuperci și conține multe substanțe nutritive necesare creșterii bacteriilor robuste.
Video al zilei
Componentele de agar nutritiv
Agarul nutritiv conține peptona de 0,5%, care este o digestie enzimatică a proteinelor animale. Peptona este principala sursă de azot organic pentru bacteriile în creștere. Agarul nutritiv conține, de asemenea, extract de carne de vită de 0,3%, care conține substanțe solubile în apă care ajută la creșterea bacteriilor, cum ar fi vitamine, carbohidrați, compuși organici de azot și săruri. Ultima componentă a agarului nutritiv este agar de 1,5%, care este agentul de solidificare.
Cum se face agar nutritiv
Se dizolvă componentele enumerate anterior în volumul dorit de apă. Pentru a face 1 litru de agar nutritiv, adăugați 5 grame de peptonă, 3 grame de extract de carne de vită și 15 grame de agar și asigurați-vă că volumul final al acestui amestec este de 1 litru prin adăugarea de apă distilată. Se încălzește amestecul în timp ce se agită pentru a se dizolva complet toate componentele. Se autoclavează amestecul dizolvat la 121 de grade Celsius timp de 15 minute pe ciclul lichidului.
Cum se toarnă plăcile cu agar nutritiv
Odată ce agarul nutritiv a fost autoclavat, lăsați-l să se răcească, dar să nu se solidifice. Adăugați antibiotice în acest moment, dacă doriți. Scoateți capacul și împrăștiați numărul adecvat de vase Petri pe o suprafață sterilă. În general, 1 litru de agar va turna aproximativ 50 de feluri mari de Petri - diametru de 100 milimetri - sau 100 de vase Petri mici - cu diametrul de 60 milimetri. Aprindeți o flacără în apropiere pentru a păstra zona sterilă și în jurul plăcilor. Când deschideți sticla de agar, treceți deschizătura prin flacără pentru ao steriliza. Se toarna agar de nutrienți în fiecare placă și se lasă plăcile pe suprafața sterilă până când agarul se solidifică. Înlocuiți capacul fiecărui vas Petri și păstrați plăcile în frigider.
Recomandări pentru plăcile de turnare și depozitare
Umpleți fiecare plăcuță la jumătate până la două treimi. Încercați să eliminați toate bulele de aer, deoarece acestea vor face dificilă răspândirea bacteriilor deasupra plăcii odată solidificate. Bule pot fi aruncate folosind flacăra. Păstrați plăcile de agar cu capul în jos în frigider. Acest lucru va împiedica condensarea pe capacul vasului Petri să picure pe agarul solidificat. Dacă depozitați plăcile pe termen lung, verificați creșterea bacteriilor sau uscarea înainte de a le folosi.Plăcile care conțin antibiotice trebuie utilizate în decurs de 2 săptămâni de la preparare.
